Zamýšlené použití

Kombinovaný test dengue NS1 Ag-IgG/IgM je rychlý chromatografický imunotest pro kvalitativní detekci protilátek (IgG a IgM) a antigenu NS1 viru dengue proti viru dengue v séru nebo plazmě, který pomáhá při diagnostice virové infekce dengue.

[SOUHRN]

Horečka dengue je akutní infekční onemocnění přenášené vektory způsobené virem dengue přenášeným komáry.Infekce virem dengue může vést k recesivní infekci, horečce dengue, hemoragické horečce dengue, hemoragické horečce dengue.Typické klinické projevy horečky dengue zahrnují náhlý nástup, vysokou horečku, bolest hlavy, silné bolesti svalů, kostí a kloubů, kožní vyrážku, sklon ke krvácení, zvětšení lymfatických uzlin, snížený počet bílých krvinek, trombocytopenii a tak dále u některých pacientů.Toto onemocnění je v zásadě oblíbené v tropických a subtropických oblastech, protože toto onemocnění přenáší komár Aides, důvod popularity má jistý sezónně, bývá každoročně běžně v květnu až listopadu, vrchol je v červenci až září.V nové epidemické oblasti je populace obecně vnímavá, ale výskyt je převážně dospělý, v endemické oblasti je výskyt převážně dětský.

Zásada

Kombinovaný test dengue NS1 Ag-IgG/IgM je kvalitativní imunoanalýza založená na membránovém proužku pro detekci protilátek proti viru dengue (IgG a IgM) a antigenu viru dengue NS1 v séru nebo plazmě.

Pro test IgG/IgM: Testovací zařízení se skládá z: 1) vínově zbarveného konjugátového polštářku obsahujícího rekombinantní obalové antigeny horečky dengue konjugované s koloidním zlatem (konjugáty horečky dengue), 2) proužku s nitrocelulózovou membránou obsahujícího dvě testovací linie (řádky T1 a T2) a kontrolní čára (čára C).Linie T1 je předem potažena protilátkou pro detekci IgM anti-dengue, linie T2 je potažena protilátkou pro detekci IgG anti-dengue.Když se do jamky na vzorek testovací kazety nadávkuje adekvátní objem testovacího vzorku, vzorek migruje kapilárním působením přes kazetu.IgG proti horečce dengue, pokud je ve vzorku přítomen, se naváže na konjugáty horečky dengue.Imunokomplex je poté zachycen činidlem předem potaženým na proužku T2, čímž se vytvoří vínová čára T2, což ukazuje na pozitivní výsledek testu IgG na horečku dengue a naznačuje nedávnou nebo opakovanou infekci.IgM anti-dengue, pokud je ve vzorku přítomen, se naváže na konjugáty horečky dengue.Imunokomplex je poté zachycen činidlem potaženým na linii T1, čímž se vytvoří vínová linie T1, což ukazuje na pozitivní výsledek testu na dengue IgM a naznačuje čerstvou infekci.Absence jakýchkoli T linií (T1 a T2) naznačuje negativní výsledek.

Pro test NS1: V tomto testovacím postupu je protilátka proti horečce dengue NS1 imobilizována v oblasti testovací linie kazety.Poté, co je vzorek plné krve/séra/plazmy umístěn do jamky na vzorek, reaguje s částicemi potaženými protilátkou anti-Dengue NS1, které byly aplikovány na podložku vzorku.Tato směs migruje chromatograficky po délce testovacího proužku a interaguje s imobilizovanou protilátkou proti horečce dengue NS1.Pokud vzorek obsahuje antigen viru dengue NS1, objeví se v oblasti testovacích proužků barevná čára indikující pozitivní výsledek.Pokud vzorek neobsahuje antigen NS1 viru dengue, neobjeví se v této oblasti barevná čára označující negativní výsledek.

Aby sloužila jako kontrola postupu, barevná čára se vždy objeví v oblasti kontrolní čáry indikující, že byl přidán správný objem vzorku a došlo k nasávání membrány.

Skladování a stabilita

Skladujte zabalené v uzavřeném sáčku při pokojové teplotě nebo v chladničce (4-30℃ nebo 40-86℉).Testovací zařízení je stabilní do data expirace vytištěného na zataveném obalu.

Test musí zůstat v uzavřeném sáčku až do použití.

Odběr a příprava vzorků

1. Kombinovaný test dengue NS1 Ag-IgG/IgM lze provést na séru nebo plazmě.

2. Odebírat vzorky plné krve, séra nebo plazmy podle pravidelných klinických laboratorních postupů.

3. Testování by mělo být provedeno ihned po odběru vzorku.Nenechávejte vzorky při pokojové teplotě po delší dobu.Pro dlouhodobé skladování by vzorky měly být uchovávány pod -20 °C.

4. Před testováním vytemperujte vzorky na pokojovou teplotu.Zmrazené vzorky musí být před testováním zcela rozmraženy a dobře promíchány.Vzorky by se neměly opakovaně zmrazovat a rozmrazovat.

Testovací postup

Před testováním nechte test, vzorek, pufr a/nebo kontroly dosáhnout pokojové teploty 15-30℃ (59-86℉).

1. Před otevřením zahřejte sáček na pokojovou teplotu.Vyjměte testovací zařízení z uzavřeného obalu a použijte jej co nejdříve.Umístěte testovací zařízení na čistý a rovný povrch.

2. Pro test IgG/IgM: Držte kapátko svisle a přeneste 1 kapku vzorku (přibližně 10 μl) do jamky (S) vzorku testovacího zařízení, poté přidejte 2 kapky pufru (přibližně 70 μl) a spusťte časovač.Viz obrázek níže.

3. Pro test NS1: Držte kapátko svisle a přeneste 8~10 kapek séra nebo plazmy (přibližně 100 μl) do jamky (S) vzorku testovacího zařízení, poté spusťte časovač.Viz obrázek níže.

4. Počkejte, až se objeví barevné čáry.Výsledky odečtěte za 15 minut.Neinterpretujte výsledek po 20 minutách.

Interpretace výsledků

Pozitivní:

Pro test IgG/IgM: Na membráně se objeví kontrolní proužek a alespoň jeden testovací proužek.Vzhled testovací linie T2 indikuje přítomnost protilátek IgG specifických pro dengue.Vzhled testovací linie T1 ukazuje na přítomnost protilátek IgM specifických pro dengue.A pokud se objeví linie T1 i T2, znamená to přítomnost protilátek IgG i IgM specifických pro dengue.Čím nižší je koncentrace protilátky, tím slabší je výsledná linie.

Pro test NS1: Objeví se dvě čáry.Jedna čára by se měla vždy objevit v oblasti kontrolní čáry (C) a další jednobarevná čára by se měla objevit v oblasti testovací čáry.

Negativní:

V kontrolní oblasti (C) se objeví jedna barevná čára. V oblasti testovací čáry se neobjeví žádná zjevná barevná čára.

Neplatný: Kontrolní řádek se nezobrazuje.Nedostatečný objem vzorku nebo nesprávné procedurální techniky jsou nejpravděpodobnějšími důvody selhání kontrolní linky.Zkontrolujte postup a opakujte test s novým testovacím zařízením.Pokud problém přetrvává, okamžitě přestaňte testovací sadu používat a kontaktujte místního distributora.